怎么判断植物已转基因(如何鉴定一种植物是转基因植物)
在植物遗传转化中,外源基因导入植物细胞的频率是相当低的。在数量庞大的受体细胞群体中,通常只有为数不多的一小部分细胞获得了外源DNA,而目的整合到基因组并实现表达的转化细胞则更少。
因此,必须采用一定的检测方法,才能筛选和鉴定出含有目的基因的重组体。目前已发展出一系列的转基因植物的筛选和鉴定方法。在这些鉴定和筛选方法,根据检测的基因功能来划分,可分为调控基因(包括启动子终止子等)检测、选择标记基因检测和目的基因直接检测。
根据检测的不同阶段区分,有整合水平检测和表达水平的检测,基因整合检测方法主要有Southern杂交、PCR、PCR-Southern杂交、原位杂交和DNA分子标记技术法,表达水平的检测包括转录水平检测和翻译水平检测,转录水平的检测法有Northern杂交和反转录PCR(reverse:transcribed:PCR,RT-PCR)检测,翻译水平的检测有酶联免疫吸附法(enzyme:linked:immuno:sorbent:assay,ELISA)和Western杂交等,其中最简便和使用广泛的表达水平的检测是报告基因检测法。由于这些方法的具体操作已在其他章节(课程)介绍过,这里只侧重介绍基于选择标记基因和报告基因的筛选和鉴定方法。
转基因植物怎么分辨转基因植物或转基因种子绝不可能通过外观区分得出来的,因为到目前为止,只有转入抗虫抗除草剂抗寒抗某种病害的基因的,从来还没有转入颜色基因的。
只能老老实实通过基因检测才可以判断是不是转基因的,而且目前只能确定是转基因的,而无法确定不是转基因的。比如如果在某种植物体内检测到bt基因,则可以判断是转基因植物,但如果某种植物体内没有检测到bt基因,最多只能确定没有转入bt基因,而不能排除转入其他基因的可能性。而且即使同是bt基因,但也可以经过不同修饰而变得序列完全不同,检测难度更大。
如何鉴定转基因植物
这个首先要知道转基因是如何操作的,一般都是通过外源的植物表达载体将外源基因整合到植物基因组中,一般用到的载体上都会带有抗生素标记,比如卡那霉素,潮霉素等等;另外,表达外源基因需要有一段外源加入的启动子序列,一般有35S启动子以及一些组织特异表达启动子比如napin启动子;
根据以上特点,可设计多对针对不同抗生素序列以及启动子序列的引物,提取DNA后进行PCR反应,鉴定即可。